Анализ \(FA\) в \(TL\) различных органов цветка Lunaria rediviva с помощью реакции омыления

Образец содержит комплексные липиды, которые трудно преобразовать в МЭЖК с помощью реакции с \(H_2SO_4\)/\(MeOH\), поэтому используем реакцию омыление.
\(С_5\) увеличили количество стандарта до 200 \(\mu L\)
исключить \(T_5\) из расчета количества!
часть \(T_4\) пролилась во время первого нагревания!
\(С_{2.1}\) дата в отчете к хроматограмме стоит неверная - 27.05.2024.

Количество цветков: 5 * 5 = 25

Пробы \(Л_i\), \(Т_i\), \(П_i\), \(ТВ_1\), \(ТН_1\), \(Пл_1\)

  1. Внести пробы

    Таблица 1. Масса проб лепестков, тычинок, пестиков

    ID

    \(m_0\), \(g\)

    \(m_1\), \(g\)

    \(m_2\), \(g\)

    \(Л_1\)

    1.0033

    1.2064

    0.2031

    \(Л_2\)

    1.0026

    1.1975

    0.1949

    \(Л_3\)

    1.0025

    1.2092

    0.2067

    \(Л_4\)

    1.0086

    1.2126

    0.2040

    \(Л_5\)

    1.0028

    1.2173

    0.2145

    \(П_1\)

    1.0009

    1.0348

    0.0339

    \(П_2\)

    1.0060

    1.0449

    0.0389

    \(П_3\)

    1.0051

    1.0375

    0.0324

    \(Пл_1\)

    2.4794

    2.4900

    0.0106

    \(Пл_2\)

    2.5265

    2.5367

    0.0102

    \(Пл_3\)

    2.4982

    2.5082

    0.0100

    \(С_{1.1}\)

    1.0015

    1.0100

    0.0085

    \(С_{1.2}\)

    1.0078

    1.0154

    0.0076

    \(С_{1.3}\)

    1.0066

    1.0150

    0.0084

    \(С_{2.1}\)

    1.0165

    1.0343

    0.0178

    \(С_{2.2}\)

    1.0142

    1.0326

    0.0184

    \(С_{2.3}\)

    1.0085

    1.0197

    0.0112

    \(С_{2.4}\)

    \(С_{3.1}\)

    1.0024

    1.0540

    0.0516

    \(С_{3.2}\)

    1.0089

    1.0694

    0.0605

    \(С_{3.3}\)

    1.0108

    1.0829

    0.0721

    \(С_{4.1}\)

    1.0051

    1.1316

    0.1265

    \(С_{4.2}\)

    1.0086

    1.1404

    0.1318

    \(С_{4.3}\)

    1.0063

    1.1342

    0.1279

    \(С_{5.1}\)

    0.8784

    1.1181

    0.2397

    \(С_{5.2}\)

    0.9088

    1.1310

    0.2222

    \(С_{5.3}\)

    0.8780

    1.0885

    0.2105

    \(Т_1\)

    1.0051

    1.0537

    0.0486

    \(Т_2\)

    1.0038

    1.0603

    0.0565

    \(Т_3\)

    1.0076

    1.0609

    0.0533

    \(Т_4\)

    0.9999

    1.0555

    0.0556

    \(Т_5\)

    1.0039

    1.0638

    0.0599

    \(ТВ_1\)

    1.0026

    1.0223

    0.0197

    \(ТВ_2\)

    0.9990

    1.0152

    0.0162

    \(ТВ_3\)

    1.0106

    1.0268

    0.0162

    \(ТН_1\)

    1.0063

    1.1000

    0.0937

    \(ТН_2\)

    1.0021

    1.0982

    0.0961

    \(ТН_3\)

    1.0089

    1.1005

    0.0916

    Где
    \(m_0\)

    Масса пустой пробирки

    \(m_1\)

    Масса пробирки с пробой

    \(m_2\)

    Масса пробы

    \(Л_i\)

    Лепестки

    \(П_i\)

    Пестики

    \(Пл_i\)

    Пыльца

    \(С_{i.j}\)

    Семена

    \(С_{1.j}\)

    Семена менее 0.5 \(mm\)

    \(С_{2.j}\)

    Семена 1.0 \(mm\)

    \(С_{3.j}\)

    Семена 2.0 \(mm\) (по 20 штук в каждой пробе)

    \(С_{4.j}\)

    Семена 4.0 \(mm\) (по 10 штук в каждой пробе)

    \(С_{5.j}\)

    Семена 6.0 \(mm\) (по 10 штук в каждой пробе)

    \(Т_i\)

    Тычинки

    \(ТВ_i\)

    Верхние части тычинок (пыльники)

    \(ТН_i\)

    Нижние части тычинок (тычиночные нити)

    Детали

    \(SD_Л\) = 0.20464 ± 0.007055 (3.4%)
    \(SD_Т\) = 0.05478 ± 0.004190 (7.6%)
    \(SD_П\) = 0.03507 ± 0.003403 (9.7%)

  2. Внести \(C_2H_5OH\): 250 \(\mu L\)

  3. Растереть пробу пестиком в пробирке

  4. Перенести все содержимое в соответствующую стеклянную виалу

  5. Внести \(C_2H_5OH\): 250 \(\mu L\)

  6. Добавить в соответствующую стеклянную виалу

  7. Внести \(KOH\)/\(H_2O\) (1/5, \(g/mL\)): 150 \(\mu L\) (с запасом, требуется 125 \(\mu L\))

  8. Внести \(17:0\) в качестве стандарта: 100 \(\mu L\)

  9. Вортексировать

  10. Греть 60 \(min\), 75 \(^\circ C\)

  11. Внести \(Hexane\): 500 \(\mu L\)

  12. Вортексировать

  13. Центрифугировать 3 \(min\), 2300 \(g\)

  14. Удалить верхнюю фазу (\(Hexane\))

  15. Внести \(H_2SO_4\)/\(H_2O\) (20%, \(v/v\)): 150 \(\mu L\)

    Количество кислоты, которое требуется внести, определяем с помощью лакмусовой бумажки (покраснение).
  16. Внести \(Hexane\): до края (~ 750 \(\mu L\))

  17. Вортексировать

  18. Центрифугировать 3 \(min\), 2300 \(g\)

  19. Отобрать верхнюю фазу (\(Hexane\))

  20. Упарить досуха в токе \(Ar\)

  21. Внести \(H_2SO_4\)/\(MeOH\) (1% \(v/v\)): 150 \(\mu L\)

  22. Греть 30 \(min\), 55 \(^\circ C\)

  23. Внести \(H_2O\): 80 \(\mu L\)

  24. Внести \(Heptane\): 150 \(\mu L\)

  25. Вортексировать

  26. Центрифугировать 3 \(min\), 2300 \(g\)

  27. Отобрать верхнюю фазу (\(Heptane\))

Изображения

AP1GczOZEBO4IbBYBejWe2cKbnvPndFrfMYJMqNJhnoyOyZJcNuqQptj2TDyvqNtV FbitjRbWV c0UkNbdVruALeysr5j b0P6FjziAlZ770S2YkZpYu0rIfky8hFHrh3sHtLl r0HUMB yNrqnKldoEed7=w1236 h925 s no gm?authuser=0

AP1GczNHZA2dh7K8yhBlLFFbM06wqluBG8ks3paXZaHFIahZ bb0EdyHj3BWZH2XUyjQbdcySA EsY6rQ6JzGajhIRFaQ WSleGkJE99TFvHUdtAwTCEhrmWpF EuMRM WVgovzn2Y4hHJgML2W6VR9CdGQr=w1236 h925 s no gm?authuser=0

AP1GczOc8k 36FXwh7MeY4Wo2C7tc7wwsm4N9 ssIoEKudivANpENuQuHMM3he8ki JLZtov0LtitBJ 68ObWfuhTWIVGcXkeKI07O5IMsy2rUgUERecC1jXWSSYrlb8L TX vjcQg0ltIbBbCDs77r5hxHQ=w1236 h925 s no gm?authuser=0

AP1GczNuXguH2HPx9AGn87zc8ktRaPOTJQI5PmlC7PGvXyqnhsUa4whpT645frBZ6IAZ IGA6 F2atNAP5JtEoeDOOmUl9QZHr5R0gQsdzC1dVUKuONAmfVhhvlfC4JcKQ4fiVJA3Z0qVRmPuj28Njtb4UhD=w721 h539 s no gm?authuser=0

AP1GczNHZA2dh7K8yhBlLFFbM06wqluBG8ks3paXZaHFIahZ bb0EdyHj3BWZH2XUyjQbdcySA EsY6rQ6JzGajhIRFaQ WSleGkJE99TFvHUdtAwTCEhrmWpF EuMRM WVgovzn2Y4hHJgML2W6VR9CdGQr=w1236 h925 s no gm?authuser=0

AP1GczP2GSqzF4NNXyIxceXgNw4hFsFL qYM mb9bP49VPqjrI hvA6na2p9EGITELffyWuXTa5 Y0CYb4SDbvvBuucZeL1Ay2hYinsy0dhGrCMPp jkdxx3NHxPFrvmtuUbH5TKMLP8H7CIzs8Y RTZ7RL6=w1236 h925 s no gm?authuser=0

AP1GczMx2ahgbWIQeUxEgcYPDtoqvWkLbi rGaEvgZ TE12 P2RndC7EOcopDOcvVo 3RqSh2BtEAT9Ab1VBMXyLK3yTyDQ9gTBPbOlOkQ9HlAqcsAw QGosCwvKxAH1EqwSQRr5HTZ5Enk6BN3D8vheGhvj=w1236 h925 s no gm?authuser=0

AP1GczMMXpnhso1k 6W4RIUkJoFxu40xRSopLPRu2kgBGvRiKZyyMB8a3mkxqzvZY7tUNdFdqLWoIhTFAOHxduuPQSACk2KktVt2VZ mYR95n0JyzEvRFV hG 4qUNFSCgztCPEz okA3niXQOuwZg1XIZ9p=w1236 h925 s no gm?authuser=0

AP1GczM8tPl78F7g6CS7e8DI9K1AGUdSyQ8FX3V7QxhUWQTsZy2IT3FxMlnBeWVIdEkoItsajtFyVLryPPo7zOkkQS9NPXy j07oauxjzXtR77jY8f2x5rP5rz7RXC3jx5t5gEJLNt8aYEyHI17S7Kt1DXA8=w1280 h416 s no gm?authuser=0

\(KOH\)/\(C_2H_5OH\)/\(H_2O\) (80%, \(v/v\)) (4%, \(m/m\))

Если необходимо избежать вымывания \(FA\) из пластика пробирок, то для этого нужно смыть пробы с пробирок чистым \(C_2H_5OH\), перенести в стеклянные виалы и только тогда добавить предварительно смешанные \(KOH\)/\(H_2O\) (1/5, \(g/mL\)).
\(C_2H_5OH\)/\(H_2O\) (80% \(v/v\))

\(\rho_0\) = 0.83911 \(g/mol\)[1]
\(V_0\) = 10 \(mL\)
\(m_0\) = 0.83911 * 10 = 8.3911 \(g\)

\(KOH\)

\(m_1\) = 4 * 8.3911 / 100 = 0.3356 \(g\)
\(m_2\) = 0.3356 / 0.85 = 0.3948 \(g\)
\(m_3\) = 0.3948 / 2 * 50 = 9.87 \(g\)

Где
\(\rho_0\)

плотность \(C_2H_5OH\)/\(H_2O\) (80% \(v/v\)) при 25 \(^\circ C\)

\(V_0\)

объем \(C_2H_5OH\)/\(H_2O\) (80% \(v/v\))

\(m_0\)

масса 10 \(mL\) \(C_2H_5OH\)/\(H_2O\) (80% \(v/v\))

\(m_1\)

масса \(KOH\) (100%), требующаяся для приготовления раствора 2 \(mL\) раствора \(KOH\)/\(H_2O\)

\(m_2\)

масса \(KOH\) (85%), требующаяся для приготовления 10 \(mL\) \(KOH\)/\(C_2H_5OH\)/\(H_2O\) (80%, \(v/v\)) (4%, \(m/m\)) или 2 \(mL\) \(KOH\)/\(H_2O\) (1/5, \(g/mL\))

\(m_3\)

масса \(KOH\) (85%), требующаяся для приготовления 250 \(mL\) \(KOH\)/\(C_2H_5OH\)/\(H_2O\) (80%, \(v/v\)) (4%, \(m/m\)) или 50 \(mL\) раствора \(KOH\)/\(H_2O\) (1/5, \(g/mL\))


1. Таблицы для определения содержания этилового спирта в водно-спиртовых растворах Том 1, с. 21. 🔗

Related