Catalpa ovata: выделение \(TL\) ([Bligh-Dyer]), этерификация \(TL\) (\(TMSH\)), этерификация \(TL\) ([Saponification])

Changelog

• 2025-11-25: выделение \(TL\) ([Bligh-Dyer])
• 2025-11-26: этерификация \(TL\) (\(TMSH\))
• 2025-12-01: этерификация \(TL\) (\([H_2SO_4/MeOH; 1\%]\))

Выделение \(TL\)

1. Добавить \(CHCl_3/MeOH\) (1/2, \(v/v\)): 4 \(mL\).
   • Перемешивать: 10 min, 250 \(RPM\).
2. Добавить \(CHCl_3\): 1.5 \(mL\).
   • Перемешивать: 5 min, 250 \(RPM\).
3. Добавить \(H_2O\): 1.5 \(mL\).
   • Перемешивать: 5 min, 250 \(RPM\).
   • Центрифугировать: 5 \(min\), 2300 \(g\).
4. Собрать нижнюю фазу.
5. Удалить верхнюю фазу.

1.0914-1.1004=0.009 \(g\) (9 \(mg\)) Гексан 900 \(uL\) ~ 10 \(mg\) / \(mL\)

Детектирование \(TAG\) (\(TLC\))

1. Нанести пробу: 3 \({\mu}g\) (3 \(uL\)).
   • Неподвижная фаза: $Silica\ gel\ 60$.
   • Подвижная фаза: \(Hexane/Et_2O\) (90/10, \(v/v\)): 10 \(mL\).
2. Опрыскать
3. Поместить в муфельную печь на 1-2 мин (следить за проявлением пятен)

Этерификация (\(TMSH\))

1. Внести пробу: 100 \({\mu}L\) (1 \(mg\))
2. Внести \(TMSH\): 300 \({\mu}L\)
   • Греть 30 \(min\), 55 \(^{\circ}C\)
3. Внести \(H_2O\): 150 \({\mu}L\)
4. Внести \(Hexane\): 300 \({\mu}L\) (в пробе нет окси кислот, поэтому можно внести чистый \(Hexane\)).
   • Вортексировать.
   • Центрифугировать.
5. Отобрать верхнюю фазу.

Этерификация (\([H_2SO_4/MeOH; 1\%]\))

NOTE: Количество $H_2O$ половина от $[H_2SO_4/MeOH; 1\%]$!

NOTE: Важно вносить $H_2O$ до $Heptane$!

1. Внести пробу: 100 \({\mu}L\) (1 \(mg\))
2. Упарить досуха в токе азота
3. Внести \(C_6H_6\): 100 \({\mu}L\)
4. Внести \([H_2SO_4/MeOH; 1\%]\): 300 $\mu L$
   • Греть 30 $min$, 55 ${\degree}C$
5. Внести $H_2O$: 150 $\mu L$
6. Внести $Hexane$: 200 $\mu L$
   • Вортексировать.
   • Центрифугировать 3 $min$, 2300 $g$
7. Отобрать верхнюю фазу

(2024-03-29-1.adoc)

. Внести $[H_2SO_4/MeOH; 1\%]$: 300 $\mu L$ . Греть 30 $min$, 55 ${\degree}C$ . Внести $H_2O$: 150 $\mu L$ + NOTE: Половина от $[H_2SO_4/MeOH; 1\%]$! + NOTE: Важно вносить $H_2O$ до $Heptane$! . Внести $Heptane$: 200 $\mu L$ . Центрифугировать 3 $min$, 2300 $g$ . Отобрать верхнюю фазу