Helianthus Annuus

Note

Образец 3 не был очищен от шелухи.

#	Масса пустой пробирки, $g$	Масса пробирки с пробой, $g$	Масса пробы, $g$	Количество семян в пробе
1	33.6330	36.3481	2.7151	50
2	33.6319	36.8111	3.1792	50
3	33.5919	36.0650	2.4731	75
4	33.5914	35.7894	2.1980	75
5	33.4945	35.8355	2.3410	75
6	33.5618	35.6694	2.1076	50
7	33.5006	36.4158	2.9152	50

11	34.6292	35.4661	0.8369	15

Выделение $TL$

Tip

Образец перемешивать в 50 $mL$ пробирке.

Tip

На один образец ~ $CHCl_3/MeOH$ (10/20, $v/v$).

Tip

Промывать ступку $CHCl_3/MeOH$ (10/20, $v/v$) 2 раза.

Tip

Собирать нижнюю фазу в 15 $mL$ пробирку.

Добавить $CHCl_3/MeOH$ (1/2, $v/v$): 12 $mL$.
- Перемешивать: 10 $min$, 250 $RPM$.
Добавить $CHCl_3$: 4 $mL$.
- Перемешивать: 5 $min$, 250 $RPM$.
Добавить $H_2O$: 4 $mL$.
- Перемешивать: 5 $min$, 250 $RPM$.
- Центрифугировать: 5 $min$, 2300 $g$.
Собрать нижнюю фазу [1, …, 11].
Удалить верхнюю фазу.
Повторить 1-6.
Добавить $Na_2SO_4$: 1 ложка (для вытягивания воды).
- Перемешивать: 5 $min$.

Tip

Образец необходимо нагреть до комнатной температуры.

Tip

При упаривании заполнять колбу не более, чем на половину.

Caution

При выключении $RA$ необходимо обустить его в крайнее нижнее положение.

Отфильтровать.
Упарить 50 $^\circ C$, 125 $RPM$.
Добавить $Acetone$ (он смешивается с водой и растворяет масло).
- Упарить 50 $^\circ C$, 125 $RPM$.
- Взвесить (ждать, пока масса не перестанет меняться).
Добавить $C_6H_6$: ~ до концентрации 200 $mg/mL$.

#	Масса пустой пробирки, $g$	Масса пробирки с $TL$, $g$	Масса $TL$, $g$	$C_6H_6$, $mL$	Отношение массы $TL$ к массе пробы, %
1	26.7727	28.0419	1.2692	6.3460	46.75
2	36.6262	38.0810	1.4548	7.2740	45.76
3	26.7727	27.7014	0.9287	4.6435	37.55
4	36.6262	37.6500	1.0238	5.1190	46.58
5	26.7727	28.0850	1.3123	6.5615	56.06
6	36.6262	37.5928	0.9666	4.8330	45.86
7	26.7727	28.0290	1.2563	6.2815	43.09

11	36.6262	37.0300	0.4038	2.0190	48.25

1000*0.4038/200=2.019 100*0.4038/0.8369=48.245

Нанести пробу: 100 $mg$ (0.5 $mL$).
- Неподвижная фаза: $Silica\ gel\ 60$.
- Подвижная фаза: $Hexane/Et_2O$ (75/25, $v/v$): 50 $mL$.
- Подвижная фаза: $Hexane/Et_2O$ (90/10, $v/v$): 50 $mL$.
Опрыскать $Dichlorofluorescein$.
Соскаблить TAG.
Добавить $Hexane/Et_2O$ (1/1, $v/v$): 5 $mL$.
- Вортексировать.
Добавить $H_2O$: 5 $mL$.
- Центрифугировать: 5 $min$, 2300 $g$.

Tip

Предварительно взвесить пустые виалы.

#	Масса пустой пробирки, $g$	Масса пробирки с $TAG$, $g$	Масса $TAG$, $g$	$C_6H_6$, $mL$
1	2.4981	2.5535	0.0554	0.554
2	2.4239	2.4883	0.0644	0.644
3	2.4454	2.5227	0.0773	0.773
4	2.4295	2.5085	0.0790	0.790
5	2.3906	2.4635	0.0729	0.729
6	2.3955	2.4657	0.0702	0.702
7	2.3614	2.4275	0.0661	0.661

11	2.4480	2.5130	0.0650	0.650

Внести пробу [1.1, 1.2. 1.3, …, 11.1, 11.2, 11.3]: 15 ${\mu}L$
Внести $TMSH$: 200 ${\mu}L$
- Греть 30 $min$, 55 $^{\circ}C$
Внести $H_2O$: 100 ${\mu}L$
Внести $Hexane$: 300 ${\mu}L$ (в пробе нет окси кислот, поэтому можно внести чистый $Hexane$).
- Вортексировать.
- Центрифугировать.
Отобрать верхнюю фазу.