Helianthus Annuus (выделение \(TL\), выделение \(TAG\))
| # |
Идентификатор |
| 1 |
Щелкунчик |
| 2 |
Лакомка |
| 5 |
Бузулук |
| # |
Масса пустой пробирки, \(g\) |
Масса пробирки с пробой, \(g\) |
Масса пробы, \(g\) |
Количество семян в пробе |
| 1 |
29.0868 |
31.7374 |
2.6506 |
30 |
| 2 |
29.1475 |
31.8910 |
2.7435 |
30 |
| 5 |
29.1097 |
31.3051 |
2.1954 |
50 |
Выделение \(TL\)
- Добавить \(CHCl_3/MeOH\) (1/2, \(v/v\)): 12 \(mL\).
- Перемешивать: 10 min, 250 \(RPM\).
- Добавить \(CHCl_3\): 4 \(mL\).
- Перемешивать: 5 min, 250 \(RPM\).
- Добавить \(H_2O\): 4 \(mL\).
- Перемешивать: 5 min, 250 \(RPM\).
- Центрифугировать: 5 \(min\), 2300 \(g\).
- Собрать нижнюю фазу.
- Удалить верхнюю фазу.
-
Повторить 1-6.
- Добавить \(Na_2SO_4\): 1 ложка (для вытягивания воды).
Фильтрация и упаривание
Tip
Образец необходимо нагреть до комнатной температуры.
Tip
При упаривании заполнять колбу не более, чем на половину.
Tip
До упаривания взвесить коническую колбу (можно взять вес из предыдущих работ).
Caution
При выключении \(RA\) необходимо обустить его в крайнее нижнее положение.
- Отфильтровать.
- Упарить: 50 C.
- Добавить \(Acetone\) (он смешивается с водой и растворяет масло).
- Упарить: 50 C.
- Взвесить (ждать, пока масса не перестанет меняться).
- Добавить \(C_6H_6\): ~ до концентрации 200 \(mg/mL\).
| # |
Масса пустой пробирки, \(g\) |
Масса пробирки с \(TL\), \(g\) |
Масса \(TL\), \(g\) |
\(C_6H_6\), \(mL\) |
Отношение массы \(TL\) к массе пробы, % |
| 1 |
26.7727 |
28.0489 |
1.2762 |
6.3810 |
0.48 |
| 2 |
36.6277 |
38.0290 |
1.4013 |
7.0065 |
0.51 |
| 5 |
26.7727 |
28.0300 |
1.2573 |
6.2865 |
0.57 |
Выделение \(TAG\) (\(TLC\))
- Нанести пробу: 100 \(mg\) (0.5 \(mL\)).
- Неподвижная фаза: $Silica\ gel\ 60$.
- Подвижная фаза: \(Hexane/Et_2O\) (75/25, \(v/v\)): 50 \(mL\).
- Опрыскать $Dichlorofluorescein$.
- Соскаблить TAG.
- Добавить \(Hexane/Et_2O\) (1/1, \(v/v\)): 5 \(mL\).
- Добавить \(H_2O\): 5 \(mL\).
- Центрифугировать: 5 \(min\), 2300 \(g\).
Tip
Предварительно взвесить пустые виалы.
- Отобрать верхнюю фазу ([8, 9, 10]).
- Упарить в токе азота.
- Взвесить.
- Добавить \(C_6H_6\): ~ до концентрации 100 \(mg/mL\).
| # |
Масса пустой пробирки, \(g\) |
Масса пробирки с \(TAG\), \(g\) |
Масса \(TAG\), \(g\) |
\(C_6H_6\), \(mL\) |
| 8 |
2.4700 |
2.5334 |
0.0634 |
0.634 |
| 9 |
2.4373 |
2.5011 |
0.0638 |
0.638 |
| 10 |
2.4763 |
2.5403 |
0.0640 |
0.640 |
Этерификация (\(TMSH\))
- Внести пробу [8.1, 8.2. 8.3, 9.1, 9.2, 9.3, 10.1, 10.2, 10.3]: 15 \({\mu}L\)
- Внести \(TMSH\): 200 \({\mu}L\)
- Греть 30 \(min\), 55 \(^{\circ}C\)
- Внести \(H_2O\): 100 \({\mu}L\)
- Внести \(Hexane\): 300 \({\mu}L\) (в пробе нет окси кислот, поэтому можно внести чистый \(Hexane\)).
- Вортексировать.
- Центрифугировать.
- Отобрать верхнюю фазу.
Ссылки
Фотографии