Acer tataricum, Acer campestre: выделение $TL$ ([Bligh-Dyer]), выделение $TAG$ ($TLC$)

#	Идентификатор
1	Клен полевой (Acer campestre)
2	Клен татарский (Acer tataricum)

Changelog

#	Масса пустой пробирки, $g$	Масса пробирки с пробой, $g$	Масса пробы, $g$	Количество семян в пробе
1 (П)	1.1215	1.6240	0.5025	?
2 (Т)	1.1248	1.7372	0.6124	25

Tip

Перемешивать в 50 $mL$ пробирках. Собирать в 15 $mL$ пробирки.

Добавить $CHCl_3/MeOH$ (1/2, $v/v$): 12 $mL$.
- Перемешивать: 10 min.
Добавить $CHCl_3$: 4 $mL$.
- Перемешивать: 5 min.
Добавить $H_2O$: 4 $mL$.
- Перемешивать: 5 min.
- Центрифугировать: 5 $min$, 2300 $g$.
Собрать нижнюю фазу.
Удалить верхнюю фазу.
Повторить 1-6.

Tip

Образец необходимо нагреть до комнатной температуры.

Tip

При упаривании заполнять колбу не более, чем на половину.

Caution

При выключении $RA$ необходимо обустить его в крайнее нижнее положение.

Отфильтровать.
Упарить.
Добавить $Acetone$ (он смешивается с водой и растворяет масло).
- Упарить.
- Взвесить (ждать, пока масса не перестанет меняться).
Добавить $Hexane/Et_2O$: ~ до концентрации 200 $mg/mL$.

#	Масса пустой пробирки, $g$	Масса пробирки с $TL$, $g$	Масса $TL$, $g$	$Hexane/Et_2O$, $mL$	Отношение массы $TL$ к массе пробы, %
1 (Т)	2.4073	2.5700	0.1627	0.8135	0.3238
2 (П)	2.3893	2.7800	0.3907	1.9535	0.6380

Tip

Собирать в 15 $mL$ пробирки.

Нанести пробу: 100 $mg$ (0.5 $mL$).
- Неподвижная фаза: $Silica\ gel\ 60$.
- Подвижная фаза: $Hexane/Et_2O$ (40/10, $v/v$): 50 $mL$.
Опрыскать $Dichlorofluorescein$.
Соскаблить TAG.
Добавить $Hexane/Et_2O$ (1/1, $v/v$): 5 $mL$.
- Вортексировать.
Добавить $H_2O$: 5 $mL$.
- Вортексировать.
- Центрифугировать: 5 $min$, 2300 $g$.

Tip

Предварительно взвесить пустые виалы.

#	Масса пустой пробирки, $g$	Масса пробирки с $TAG$, $g$	Масса $TAG$, $g$	Концентрация, $mg/mL$
1 (Т)	2.3810	2.4106	0.0296	29.6
2 (П)	2.3931	2.4188	0.0257	25.7

$СН_3ONa$ - метилат натрия.

Tip

С Метилатом натрия 50 $^{\circ}C$.

Внести пробу [1.1, 1.2. 1.3, 2.1, 2.2, 2.3]: 50 ${\mu}L$ (~ 1.5 $mg$)
Внести $СН_3ONa$: 200 ${\mu}L$
- Греть 30 $min$, 50 $^{\circ}C$
Внести $H_2O$: 100 ${\mu}L$
Внести $Hexane$: 300 ${\mu}L$ (в пробе нет окси кислот, поэтому можно внести чистый $Hexane$).
- Вортексировать.
- Центрифугировать.
Отобрать верхнюю фазу.