1.4 Выделение липидов из природных образцов

  • Основной принцип: Выделение (экстракция) липидов основано на их способности растворяться в водонерастворимых органических растворителях.
  • Главная задача: Провести экстракцию так, чтобы минимизировать деградацию липидов, особенно полиненасыщенных.
  • Оптимальные условия:
    • Температура: Низкая (в идеале -20°C или ниже).
    • Атмосфера: Инертная (например, азот) для предотвращения окисления двойных связей.
  • Проблема с ферментами: В тканях присутствуют активные ферменты (липазы, фосфолипазы), которые могут быстро разрушать липиды.
  • Инактивация ферментов:
    • Быстрое замораживание образца.
    • Кратковременное кипячение.
    • Экстракция горячим изопропанолом.
  • Распространенный метод: Метод Блайя и Дайера, использующий смесь хлороформа, метанола и воды. Эта смесь создает одну фазу, которая эффективно гомогенизирует ткань и экстрагирует практически все липиды.